Igg эпштейн барр

Диагностика патологий, ассоциированных с вирусом Эпштейна-Барр, подразумевает выявление уровня антител к ядерному антигену, капсидному и раннему.

Ядерный антиген вируса Эпштейна-Барр представляет один из белков вирусной частицы, наличие иммуноглобулинов к которому говорит о хронизации процесса, а присутствие их после реконвалесценции объясняется циркуляцией клеток памяти. Антитела к вирусу Эпштейна-Барр способствуют различию стадии и формы инфекции.

Общая характеристика патогенеза и антигенов ВЭБ

Вирус Эпштейна-Барр относится к 4 типу патогенов из семейства герпесвирусов, проявляет сродство к лимфоцитам, обладает онкогенными и иммунодепрессивными свойствами.

Структура Epstein-Barr virus сложная, поэтому при диагностике применяют несколько анализов для верификации ВЭБ в организме. Кроме того, исходя из выявленных показателей, удается определить давность инфицирования и форму инфекции.

Структура вириона представлена следующими, диагностически важными, белками:

  • VСА – наружный или капсидный антиген;
  • ЕВNА – внутренний или ядерный антиген;
  • МА – антиген мембраны;
  • ЕА – ранние (диффузный ЕАD и локализованный ЕАR).

В-клетки одними из первых принимают удар, а далее, вирус распространяется по остальной лимфатической системе.

Первое заражение вирусом сопровождается поражением 30% В-лимфоцитов. ДНК вируса Эпштейна-Барр поступает в клеточное ядро, при этом лимфоциты становятся «бессмертными»: несмотря на инфицирование, они непрерывно размножаются, что определяется присутствием атипичных мононуклеаров.

В период бессимптомного течения ВЭБ-инфекции вирион, персистирующий в лимфоцитах, экспрессирует ядерные и мембранные белки, что означает возникновение антител к указанным антигенам.

Ядерный антиген вируса Эпштейна-Барр провоцирует недоступность зараженных В-клеток для уничтожения иммунокомпетентными клетками.

В результате пораженные лимфоциты продолжают размножаться. Пролиферация их становится вирусзависимой.

В ответ на поражение В-лимфоцитов начинает активизироваться клеточное звено иммунитета, а именно Т-лимфоциты. Они тормозят избыточное размножение пораженных клеток, поэтому в анализах крови определяется лимфоцитоз, не только атипичные мононуклеары.

Цитотоксические иммунные клетки и киллеры (NK) сдерживают пул зараженных В-лимфоцитов, ограничивая патологический процесс, однако, погрешности иммунитета приводят к недостаточной атаке и постепенной пролиферации инфицированных человеческих клеток.

Поэтому при терапии инфекционного мононуклеоза и различных состояний, обусловленных ВЭБ-инфекцией, предпочтительно выполнить иммунограмму.

Во рту инфицированные клетки длительно локализуются в миндалинах, обуславливая выделение вирусных частиц с выдыхаемым воздухом, кашлем. ВЭБ покидает разрушенные В-лимфоциты для поражения новых.

Но описывают и иной тип паразитирования вируса Эпштейна-Барр в клеточных элементах – скрытый, когда образуется малое количество копий вируса, поддерживая тем самым носительство.

Вирус инфицирует не только В-клетки, но и ряд других клеток, несущих иммунную функцию, эпителиоциты сосудов. ДНК вируса в ядре может существовать в двух формах: кольцевая структура (эписома) или встроенная в геном.

Последняя приводит к хромосомным нарушениям, что лежит в основе онкологических заболеваний, ассоциированных с вирусом Эпштейна-Барр.

Важно!

В процессе размножения вируса образуется более 70 белков, но современные достижения медицины позволяют обнаружить антитела в крови у человека только к 4 антигенам ВЭБ.

Показатели крови к вирусу герпеса 4 типа расшифровываются следующим образом:

  1. Ранний антиген вириона обеспечивает выработку антител в начале заражения или при обострении.
  2. Капсидный антиген вируса Эпштейна-Барр характеризуется продукцией иммуноглобулинов в острой фазе начала патологии, при реактивации процесса. Особенностью считается наличие иммуноглобулинов к капсидному белку VCA как при обострении хронической инфекции, так и при ремиссии.
  3. Антитела к ядерному белку вируса определяются при любой разновидности формы хронической патологии. После выздоровления от острой формы их наличие означает циркуляцию антител памяти: инфекция протекала ранее.
  4. Антитела к мембранному антигену циркулируют при скрытом течении ВЭБ-инфекции.

Образуют структуру вириона капсидный, ядерный и мембранный антигены – они считаются уникальными или вирусоспецифическими.

Антитела IgG и IgM — что это?


Иммунная система человека в ответ на внедрение чужеродных агентов инфекционного происхождения реагирует продукцией специальных антител – иммуноглобулинов, которые инактивируют патогены.

Антитела классифицируются на несколько разновидностей, из которых для большинства инфекций актуально определение двух: M и G.

В чем разница антител IgM и IgG? Белки разновидности (класса) М продуцируются первыми в ответ на проникновение возбудителя или повторную реактивацию процесса. Антитела IgM к вирусу Эпштейна-Барр самоустраняются примерно спустя три месяца от начала болезни.

IgG продуцируются через несколько недель и определяются в крови всю жизнь, означая, что инфекция перенесена пациентом ранее.

IgG положительный – что это значит?

Вопрос возникает у многих людей, так как в рамках профилактического или диагностического обследования у взрослого человека будет такой результат с вероятностью ближе к 90%. Практически все взрослые люди инфицированы ВЭБ. Анализ означает, что инфекция перенесена.

При исследовании крови иммунохемилюминисцентным методом или ИФА выдают количественный результат, значения которого подразумевают отрицательный, сомнительный, положительный ответы.

Если получен сомнительный ответ, анализ крови повторяют через 7 дней. В случае второго сомнительного ответа анализ считают отрицательным.

Авидность позволяет установить срок давности заражения вирусным агентом. Авидность IgG к вирусу Эпштейна-Барр описывается большими значениями при давнем инфицировании, а низкое – говорит о свежем заболевании.

Расшифровка анализа на вирус Эпштейна-Барр помогает выяснить сроки попадания патогена в организм, форму инфекции.

Ранний антиген

Вскоре после поражения В-клеток в крови начинает формироваться пул иммуноглобулинов к раннему антигену. Когда уровень иммуноглобулинов достигает порогового уровня, их можно зафиксировать лабораторным методом.

Ранний антиген вируса Эпштейна-Барр не является структурным, он необходим для размножения вириона, к нему продуцируются антитела класса IgM и IgG.

Антитела IgM к раннему белку ВЭБ довольно рано формируются и так же быстро исчезают, поэтому выявить их зачастую не удается.

Это объясняется довольно длительным инкубационным сроком инфекционного мононуклеоза. Пока ВЭБ размножается в В-лимфоцитах в инкубации, симптомов не наблюдается.

Антитела IgG к раннему антигену начинают свою выработку уже при начавшейся симптоматике – в фазу разгара.

Таким образом, идентификация иммуноглобулинов к белку раннего типа является тестом ранней диагностики. При этом длительное сохранение антител IgG к ЕА говорит о хронизации, а рост считается маркером обострения.

Капсидный антиген

Антитела к капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр IgM начинают формироваться по окончании инкубации (в начале патологии) и к моменту разгара клиники имеют значения, определяемые лабораторно.

Важно!

Антитела класса IgM на капсидный антиген положительные и определяются на максимуме в течение 1,5 месяцев от начала заболевания, через полгода они снижаются.

Если иммуноглобулины М на капсидную форму белка вируса Эпштейна-Барр положительные на протяжении больше 12 недель, подозревают затяжной мононуклеоз и иммунодефицит.

Таким образом, положительный результат анализа крови на IgM к капсидному антигену подтверждает острую инфекцию. IgG положительный на первом месяце болезни, а пик достигается на 8 неделе от момента развития клиники.

При отсутствии признаков положительный IgG на капсидный антиген к вирусу Эпштейна-Барр подтверждают, что инфекция перенесена. Эти иммуноглобулины называют клетками памяти.

Если анализ выполняют в течение всей инфекции и определяют постепенное нарастание значения антител IgG, то выставляют острую инфекцию первичного характера.

Если в крови пациента длительно присутствуют IgG к VCA и к ЕА, возрастает вероятность хронизации. Очень высокие уровни IgG к VCA могут указывать на лимфому Беркитта и рак назофарингеальной области.

Ядерный антиген

Антитела к ядерному антигену EBNA начинают продуцироваться после патологии в период реконвалесценции. Определению в большинстве подлежат иммуноглобулины IgG.

Антитела к EBNA могут фиксироваться несколько лет после острого мононуклеоза. Возрастает их количество на третьем-двенадцатом месяце от момента начала болезни.

Следует знать, что отсутствие этих иммуноглобулинов при параллельной циркуляции антител IgM к VCA, а также антител IgG к ЕА, указывает на текущий инфекционный мононуклеоз.

Если ранее результат на EBNA был негативный, а затем стал положительный – предполагают существующую инфекцию.

При наличии клиники мононуклеоза или другой ВЭБ-патологии изредка отсутствие данных иммуноглобулинов к Эпштейна-Барр указывает на выраженный иммунодефицит.

Обнаружение в крови антител к EBNA классов IgM при негативных IgG показывает на острое инфицирование. Если соотношение обратное, то процесс считается перенесенным ранее.

Обнаружение ДНК


С целью непосредственного обнаружения вирусной ДНК в биоматериале больного применяют ПЦР. Благодаря этому способу удается выявить вирус в следующих образцах и:

  • в слюне;
  • в цервикальном канале;
  • в секрете предстательной железы;
  • в моче;
  • в соскобе из уретры.

С помощью ПЦР удается обнаружить не менее 80 вирионов в 5 мкл биологической жидкости. Специфичность теста приближается к 100%.

Результат возможно расценить двояко. Положительный ПЦР в слюне на вирус Эпштейна-Барр свидетельствует о носительстве или заболевании. Если присутствует характерная клиника и результат ПЦР положительный, диагноз подтверждается.

ДНК Эпштейна-Барр удается зафиксировать в начале заболевания. Спонтанное выделение возбудителя при исключении наличия клиники указывает на носительство.

В слюне ДНК определяют в конце инкубации, в фазе разгара и в течение полугода после выздоровления.

ВЭБ могут определять качественно и количественно при лечении хронической формы, при иммунодефиците на фоне Эпштейна-Барр, при терапии опухолей, связанных с вирусом.

Определение DNA EBV (Эпштейн-Барр вируса) в количественном выражении необходимо для анализа эффективности лечения, так как количественная ПЦР позволяет выявить вирусную нагрузку.

Если со временем при терапии число копий снижается, тактика выбрана верно. В норме копий вируса в биоматериале быть не должно.

Диагностика ВЭБ-инфекции имеет большое значение при планировании беременности, у часто болеющих детей и взрослых, пожилых людей.

С целью выбора адекватной тактики лечения, идентифицируют антитела к белкам Эпштейна-Барр, а также определяют ДНК с помощью ПЦР. Анализы помогают выявить давность заражения и форму инфекции.

Куликовская Н.А., врач-инфекционист

Полезное видео

Вирус Эпштейна-Барр: что означает положительный IgG

С помощью серологического метода можно определить антитела к вирусу Эпштейна-Барр. Такой способ диагностики позволяет судить о стадии течения заболевания и реакции иммунной системы. Появление различных классов антител происходит в определенной последовательности, которая давно изучена.

Антигенная структура вируса

После попадания в организм вируса иммунные клетки начинают выделять антитела. Они являются специфическими белками, которые реагируют с определенным антигеном. Антиген — это белок, полисахарид или нуклеиновая кислота, которая принадлежит другому организму и воспринимается как чужеродное вещество. Антитела выделяются лимфоцитами. Они прикрепляются к антигену и блокируют его. Так развивается ответная иммунная реакция.

Каждый возбудитель имеет свою антигенную структуру. У вируса Эпштейна-Барр она представлена следующими веществами:

  • S-антиген, является специфическим для данной группы микроорганизмов, это протеины нуклеокапсида — ядерной оболочки вируса.
  • V — специфичен для определенного типа микроорганизмов, образован гликопротеинами внешней оболочки. Эти два антигена характерны для семейства герпесвирусов.
  • Ранний антиген (ЕА).
  • Мембранный (МА) — определяется на поверхности зараженной клетки.
  • Комплемент, связывающий ядерный антиген (EBNA).
  • Капсидный антиген (VCA) — поздний антиген.

К ядерному и капсидному антигену вируса определяются антитела, принадлежащие к иммуноглобулинам классов М и G.

Порядок образования антител

Иммуноглобулины — специфические белки лимфоцитов. После появления в крови вируса и его антигенов лимфоциты начинают вырабатывать Ig. Первыми регистрируют иммуноглобулины, принадлежащие к классу М, которые синтезируются к раннему и капсидному антигену. Анти-VCA IgM могут определяться еще до появления клинических симптомов и в начале болезни. Высокие концентрации регистрируются на 1—6 неделе после попадания в кровь возбудителя, но уже с 3 недели постепенно начинают снижаться. Полностью исчезают в крови не ранее, чем через 1—6 месяцев после выздоровления.

Иммуноглобулины к раннему антигену появляются в острый период и исчезают быстро после выздоровления. Высокие концентрации сохраняются при обострении, а также у больных онкологическими заболеваниями, при аутоиммунных процессах и иммунодефицитных состояниях.

IgG выделяются к капсидному антигену, появляются рано — на 1—4 неделе болезни. Максимальное значение достигается ко 2 неделе, сохраняются пожизненно в более низкой концентрации. У детей младше 7 лет могут не определяться после перенесенного заболевания. Постоянные высокие титры VCA IgG говорят о хронической инфекции. Если в анализах получился отрицательный результат, то это может говорить об отсутствии контакта с вирусом или о том, что кровь взяли в раннем периоде, когда антитела еще не выработались в нужном количестве.

Результат анализа не может быть единственным основанием для диагноза. Необходимо сопоставлять его с симптомами и другими исследованиями.

Определение антител к ядерному антигену вируса можно проводить в период выздоровления. В острую фазу болезни они еще не синтезируются. Только на 3—12 месяц может быть положительная реакция на EBNA IgG. Определяться они могут на протяжении многих лет. Если в анализах нет нуклеарного антитела класса G, но присутствуют положительные капсидные IgM, то можно судить о существовании инфекции в данный момент. Если происходит реактивация возбудителя, то нуклеарный IgG снова увеличивается.

Определение антител к капсидному антигену

Антитела к VCA Ig определяются методом хемолюминесцентного иммунного анализа. Для интерпретации анализа опираются на величину 20,0 Ед/мл. Если определяется количество антител меньше, чем это число, то результат отрицательный, равное или большее количество — положительный. Если количество антител не определяется или указывает на отрицательный результат, то это не всегда отсутствие контакта с вирусом, в некоторых случаях такой результат говорит об острой фазе болезни. Чтобы исключить подозрения, через 10—14 нужно повторить анализ и дополнительно сдать на IgM.

Анализ на антитела к ядерному антигену

Анализ выполняют в срок до 5 дней. Используется также хемолюминесцентный анализ. Результаты интерпретируют в зависимости от полученных чисел:

  • менее 5 Ед/мл — отрицательный результат;
  • от 5 до 20 Ед/мл — сомнительный результат;
  • более 20 Ед/мл — положительный результат.

Большие концентрации IgG против вируса Эпштейна-Барр говорят о положительном результате и об острой инфекции. Отрицательный результат при аналогичных иммуноглобулинах M и G говорит об отсутствии болезни. Увеличение IgG к ядерным антителам в фазу острой инфекции — показатель выздоровления. Концентрация иммуноглобулинов 5—20 Ед/мл говорит о том, что, скорее всего, контакт с возбудителем был в прошлом. Повторное исследование проводят через 2 недели.

Показания для исследования и подготовка к анализам

Для проведения исследования врач определяет необходимость проведения диагностики. Показаниями служат:

  • подтверждение диагноза мононуклеоза;
  • оценка эффективности лечения;
  • определение стадии развития болезни;
  • у больных раком для выявления причины патологии, связанной с вирусом Эпштейна-Барр.

Для подготовки к анализу необходимо прийти натощак в лабораторию. Последний прием пищи должен был быть не позднее 20 часов вечером. За сутки до проведения анализа исключают алкоголь, жирную пищу, физические нагрузки и стресс.

Исказить результат анализа могут хилез (большое содержание жиров в крови), гемолиз пробы крови (распад клеток), получение лучевого лечения и химиотерапии. Правильно выполненный анализ после соответствующей подготовки помогает сопоставить клинические данные с его результатом и не ошибиться с диагнозом.

Вирус Эпштейна-Барр из группы герпесов был открыт относительно недавно, в 1964 году. Он до конца не изучен, однако, исследованиями подтверждена прямая или косвенная связь данного возбудителя с развитием ряда серьезных патологий, в том числе онкологических. Поэтому важной частью комплексной диагностики при болезнях неясной этиологии и иммунодефицитных состояниях является анализ крови на антитела к ВЭБ.

Показания к обследованию на ВЭБ

При заражении вирус Эпштейна-Барр (он же гаммагерпесвирус IV типа), в первую очередь атакует защитную систему организма. Он проникает в В-лимфоциты и искажает иммунный ответ, что провоцирует неадекватную реакцию на инфекции и собственные клетки человека.

Необходимо подтвердить или исключить влияние ВЭБ-инфекции, если:

  • по совокупности внешних симптомов и показателям крови у больного можно предположить инфекционный мононуклеоз;
  • очень часто возникают ОРВИ и ОРЗ, иммунитет заметно снижен;
  • у ребенка или взрослого часто диагностируется ангина (3-4 раза в год и чаще);
  • простудные заболевания сопровождаются увеличением лимфатических узлов на шее, налетом в горле, высокой температурой (выше 38-39 градусов);
  • у ребенка наблюдается одновременное увеличение миндалин, лимфоузлов и аденоидов (на фоне частых простуд);

Женщинам, планирующим беременность, носителям ВИЧ, онкобольным также необходимо контролировать статус инфекции Эпштейна-Барр. При лечении ВЭБ повторные анализы назначают для контроля эффективности терапии.

Строение вируса и иммунный ответ

Серологическое исследование, популярное для диагностики вируса Эпштейна-Барр, основывается на анализе иммунного ответа организма на проникновение возбудителя. Защитная реакция человеческого иммунитета – это выработка антител для нейтрализации обнаруженного антигена. Немного терминологии для лучшего понимания:

  1. Антиген – это белковая молекула (иногда – полисахарид или нуклеиновая кислота), которую иммунная система воспринимает как чужеродную и стремится уничтожить. Это могут быть бактерии, вирусы и их фрагменты, пыльца растений, некоторые продукты и другие протеиновые соединения. При сбоях в работе иммунитета собственные белки организма могут восприниматься как антигены.
  2. Антитело – особый белок (иммуноглобулин), вырабатываемый лимфоцитами для связывания и блокирования антигена. К каждому виду антигена вырабатываются специфические защитные белки.

Защитный белок-иммуноглобулин соединяется с чужеродной молекулой по принципу «замок-ключ» и останавливает размножение инфекционного агента.

Возбудитель инфекции Эпштейна-Барр структурно представляет собой двухцепочечную молекулу ДНК (ядро, или нуклеар), окруженную оболочкой-капсидом, и покрытую внешней мембраной, включающей гликопротеиды для закрепления на слизистой. Эти элементы являются антигенами для иммунной системы человека:

  • нуклеарный (ядерный) антиген (EBNA) вируса Эпштейна-Барр;
  • капсидный (VCA) – белковая оболочка ядра;
  • мембранный (MA) – наружная мембрана;
  • ранний (EA) — гликопротеиды во внешней оболочке вируса.

К каждому из них В-лимфоциты человеческого организма вырабатывают несколько типов иммуноглобулинов, отличающихся по времени появления, структуре и назначению.

Исследование на антитела к вирусу Эпштейна-Барр

Цель серологической диагностики — выявление в крови антител к инфекционным возбудителям. К ней относятся следующие методы исследования:

  1. РИФ – реакция иммунофлюоресценции.
  2. ИФА – иммуноферментный анализ.
  3. ИХЛА – иммунохемилюминесцентный анализ.

Самым распространенным из них является метод ИФА, который применяется в большинстве российских медучреждений. С его помощью выявляют присутствие различных герпесвирусов, токсоплазмоза, гепатитов, кори и краснухи, а также других инфекционных заболеваний. Преимущества такого способа исследования очевидны:

  1. Очень высокая специфичность и чувствительность. Метод позволяет обнаружить искомое соединение даже в том случае, если его концентрация крайне мала.
  2. Низкая вероятность ошибки, человеческий фактор малозначим при этом исследовании. Это свойство обусловлено высокой технологичностью используемых реагентов и тест-систем.
  3. Возможность диагностировать заражение на самой ранней стадии, еще до появления клинических симптомов.

Однако есть и минусы, которые нужно иметь в виду:

  • высокая стоимость исследования;
  • узкая специфичность – назначая исследование, врач должен с большой долей вероятности предполагать, какая инфекция провоцирует заболевание;
  • позволяет обнаружить в крови антитела, но не самого возбудителя.

Обычно исследование направлено на выявление следующих типов антител к вирусу Эпштейна-Барр:

  1. IgM (VCA) — иммуноглобулин класса М к капсидному антигену. Они вырабатываются с первых дней заражения и примерно 6 месяцев после инфицирования, а так же в период рецидива вирусной активности.
  2. IgG (VCA) – иммуноглобулин класса G к капсидному антигену. Начинают вырабатываться организмом спустя примерно 20 дней после инфицирования, и затем обнаруживаются в крови на протяжении всей жизни.
  3. IgG (EA) — антитела класса G к раннему антигену. Как правило, вырабатываются в течение примерно полугода с момента заражения, затем исчезают. При латентной форме инфекции Эпштейна-Барр не определяются.
  4. IgG (EBNA) – поздние иммуноглобулины к нуклеарному (ядерному) антигену вируса Эпштейна-Барр. Они указывают на наличие устойчивого иммунитета к возбудителю, начинают формироваться после исчезновения внешних симптомов, примерно через полгода после заражения. Если их титр повышен у ребенка или взрослого, это может говорить о рецидиве инфекции.

Результаты качественного и количественного анализа на эти виды иммуноглобулинов, в совокупности с клинической картиной заболевания, дают врачу достаточно информации для постановки диагноза и назначения терапии.

Правила сдачи анализа

Чтобы результат исследований был максимально достоверным, перед сдачей крови нужно выполнить ряд условий:

  1. Полсуток не принимать никаких лекарств. Если это невозможно, то сотрудников лаборатории нужно предупредить о принятых препаратах.
  2. Также в течение 12 часов до сдачи крови на инфекцию Эпштейна-Барр нельзя употреблять алкоголь, курить.
  3. Физические нагрузки необходимо ограничить.
  4. Кровь сдается строго натощак! (полсуток до анализа нельзя принимать пищу). Поэтому забор крови для исследования проводят обычно рано утром.
  5. Детей дошкольного возраста нужно поить перед сдачей анализа теплой кипяченой водой (понемногу, на протяжении получаса перед забором материала).

Нарушение этих правил может привести к искажению результатов: тогда потребуется повторная сдача крови, либо может быть назначено неверное лечение.

К изменению значений также приводят лучевая или химиотерапия, получаемые в период сдачи анализа, избыток жировых клеток в крови, токсоплазмоз.

Расшифровка анализа

Интерпретация анализов на антитела к вирусу Эпштейна-Барр, особенно количественных, не универсальна. Показатели нормы могут различаться в зависимости от вида используемых реагентов и метода исследования. Поэтому к расшифровке результата необходим индивидуальный подход, и доверить ее нужно специалисту.

Полное представление о текущем статусе инфекции Эпштейна-Барр в организме можно получить, только сопоставив данные всех видов исследований и имеющиеся симптомы. Предварительно оценить анализ крови на антитела поможет следующая информация: антитела IgM к капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр могут обозначаться в бланке анализа так: ат VCA IgM, anti-VCA IgM, ВЭБ VCA IgM, анти-VCA IgM. Если иммуноглобулины класса М к капсидному белку обнаружены, это говорит об активном статусе вирусной инфекции. В первые недели после заражения их количество максимально. Примерно с 3-й недели начинает снижаться, и в течение полугода исчезает полностью.

Отрицательный результат указывает на отсутствие вируса либо на латентную (скрытую) инфекцию. Антитела IgG к капсидному антигену зашифрованы в результатах в виде: EBV VCA IgG, ат VCA IgG. Появляются также в начале острой фазы заболевания, в течение первого месяца после инфицирования. Наибольшие значения фиксируются ко второму месяцу болезни. По мере выздоровления количество уменьшается, однако их присутствие в сыворотке крови может сохраняться несколько лет после заражения.

Положительный результат на иммуноглобулины класса G к капсидному белку говорит либо об острой фазе инфекции, либо о перенесенной ранее болезни и устойчивом иммунитете к вирусу Эпштейна-Барр.

Отрицательный IgG значит, что либо человек никогда не был заражен ВЭБ-инфекцией, либо она находится в стадии ремиссии:

  1. Антитела IgG к ядерному (нуклеарному) антигену возбудителя Эпштейна-Барр появляются на поздней стадии заболевания. В острой фазе болезни обычно отсутствуют, начинают формироваться спустя примерно 3-6 месяцев после заражения и обнаруживаются в крови в течение многих лет. Анти-EBNA IgG положительный говорит о перенесенной в прошлом инфекции Эпштейна-Барр и наличии иммунитета к ней. Если значение отрицательно – можно предположить начальную стадию заболевания либо отсутствие возбудителя в организме.
  2. Антитела класса G к раннему антигену — вырабатываются при первичном инфицировании, в острой фазе заболевания. При выздоровлении быстро исчезают. Такой анализ применяется для ранней диагностики вирусной инфекции Эпштейна-Барр. Высокие титры ЕА IgG обнаруживают при иммунодефицитных состояниях, ВЭБ-ассоциированных онкологических заболеваниях, хроническом инфекционном процессе.

Возможные комбинации иммуноглобулинов к вирусу Эпштейна-Барр трактуются следующим образом:

  1. EBNA IgG- VCA IgG- VCA IgM+: ранняя стадия болезни, первичное инфицирование.
  2. EBNA IgG- VCA IgG+ VCA IgM+: первичное инфицирование, острая стадия болезни.
  3. EBNA IgG+ VCA IgG+ VCA IgM+: активный инфекционный процесс, первичное заражение либо рецидив.
  4. EBNA IgG- VCA IgG- VCA IgM-: заражения не было (отсутствие вируса), либо есть выраженный иммунодефицит.
  5. EBNA IgG+ VCA IgG+ VCA IgM-: латентная (скрытая) инфекция, пациент является носителем вируса.
  6. Если обнаружены только антитела G к ядерному антигену – это тоже говорит о давно перенесенном заболевании и наличии «спящего» ВЭБ в организме.

Общая клиническая картина складывается из соотношения в анализе иммуноглобулинов IgM и IgG. Серологические исследования не всегда дают абсолютно точный результат, к тому же инфекция Эпштейна-Барр может развиваться в атипичной форме (при этом ряд антител отсутствует). Поэтому врач может назначить дополнительные обследования.

Авидность антител

В ряде случаев для уточнения диагноза может потребоваться анализ на авидность антител к вирусу Эпштейна-Барр. Индекс авидности определяет прочность связи между антигеном и защитным белком. При первичном заражении он достаточно низкий, но в ходе «борьбы» между иммунной системой и вирусом постепенно растет. Высокоавидные антитела, обнаруженные в пробах крови, указывают на рецидив инфекции. Иммуноглобулины с низким индексом свидетельствуют о первичном заражении.

Вирус Эпштейна-Барр широко распространен среди населения всего мира, поэтому наличие антител к нему не является чем-то исключительным и редким. Однако в случае низкого иммунитета, часто рецидивирующих заболеваний, синдрома хронической усталости — своевременное выявление причины очень важно. Вовремя обнаружив активную инфекцию и начав лечение, можно предотвратить тяжелые последствия для здоровья.

С этим также читают

  • Показатели анализа крови при инфекционном мононуклеозе у детей
  • Как сдавать ПЦР на вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) и для чего его делают
  • Симптомы и лечение вируса герпеса 4 типа у взрослых и детей
  • Какие анализы крови необходимо сдавать на вирус простого герпеса (ВПГ) и для чего это нужно

БЕЛКИ

Структура и молекулярная масса РНК-геномов вирусов животных

Таблица 4.

Семейство Структура Информационные функции Молекулярная масса
Пикорнавирусы Линейная однонитчатая «Плюс»-нитевая 2,7·106
Тогавирусы Линейная однонитчатая «Плюс»-нитевая 4·106
Парамиксовирусы Линейная однонитчатая «Минус»-нитевая 5·106-7,5·106
Рабдовирусы Линейная однонитчатая «Минус»-нитевая 3,8·106-4,5·106
Ортомиксовирусы Фрагментированная (8 уникальных фрагментов) «Минус»-нитевая От 0,2·106 до 1·106, всего 5·106
Буньявирусы Фрагментированная однонитчатая кольцевая (3 уникальных фрагмента L, M, S) «Минус»-нитевая L 3· 106-5·106 M 1·106-2·106 S 0,4·106-0,8·106
Аренавирусы Фрагментированная однонитчатая кольцевая и линейная формы; 2 вирус-специфических фрагмента L и S «Амбисенс»» L 2,1·106-3,2·106 S 1,1·106-1,6·106
Реовирусы Фрагментированная двунитчатая (10—12 уникаль­ных фрагментов) ДиплоРНК-вирусы 0,2·106-3·106
Ретровирусы Однонитчатая, 2 иден­тичные молекулы «Плюс»-нитевая, в составе внутриклеточной формы По 3·106, всего 6·106-7·106

В зараженной клетке вирусный геном кодирует синтез двух групп белков: 1) структурных, которые входят в со­став вирусных частиц потомства, и 2) неструктурных, которые обслуживают процесс внутриклеточной репродукции вируса на разных его этапах, но в состав вирусных частиц не входят.

СТРУКТУРНЫЕ БЕЛКИ

Количество структурных белков в составе вирусной частицы варьирует в широких пределах в зависимости от сложности организации вириона. Наибо­лее просто организованный вирус табачной мозаики со­держит всего один небольшой белок с молекулярной массой 17-18·103, некоторые фаги содержат 2-3 белка, просто организованные вирусы животных — 3-4 белка. Сложно устроенные вирусы, такие как вирусы оспы, содержат более 30 структурных белков.

Структурные белки делятся на 2 группы:

1) капсидные белки, образующие капсид, т. е. футляр для нуклеиновой кислоты вируса (от лат. capsa — вме­стилище), и входящие в состав капсида геномные белки и ферменты;

2) суперкапсидные белки, входящие в состав суперкапсида, т. е. наружной вирусной оболочки.

Поскольку суперкапсид называют также «пеплос» (от греч. peplos — покров, мантия), эти белки называют пепломерами.

Просто организованные вирусы, представляющие собой нуклеокапсид, содержат только капсидные белки. Сложно организованные вирусы содержат капсидные и суперкап­сидные белки.

Капсидные белки. Первоначальное представление о том, что капсидные белки являются всего лишь инерт­ной оболочкой для вирусной нуклеиновой кислоты, сложи­лось на основании изучения наиболее просто организо­ванного вируса табачной мозаики, частица которого со­стоит из одной молекулы РНК и одного типа белка, образующего чехол для РНК.

Однако такое представление неправильно. Хотя основной функцией капсидных белков является функция защиты вирусного генома от неблагоприятных воздействий внешней среды, у многих вирусов в составе капсида есть белки и с другими функциями. Поэтому термин «капсид» далеко выходит за пределы представления о нем как о футляре или чехле для вирус­ной нуклеиновой кислоты.

В составе капсида некоторых вирусов (пикорнавирусы, паповавирусы, аденовирусы) содержатся белки, ковалентно связанные с вирусным геномом (геномные белки). Эти белки являются терминальными, т. е. соединенными с концом вирусной нуклеиновой кислоты. Функции их неразрывно связаны с функциями генома и их регуля­цией»

У ряда сложно организованных вирусов в составе кап­сида имеются ферменты, осуществляющие транскрипцию и репликацию вирусного генома — РНК и ДНК (РНК и ДНК-полимеразы), а также ферменты, модифицирую­щие концы иРНК. Если ферменты и геномные белки представлены единичными молекулами, то капсидные бел­ки представлены множественными молекулами. Эти белки и формируют капсидную оболочку, в которую у сложно организованных вирусов вставлены молекулы белков с дру­гими функциями.

Основным принципом строения капсидной оболочки вирусов является принцип субъединичности, т. е. построе­ние капсидной оболочки из субъединиц — капсомеров, обра­зованных идентичными полипептидными цепями. Правильно построенные белковые субъединицы — капсомеры возникают благодаря способности вирусных капсидных белков к самосборке. Самосборка объясняется тем, что упорядоченная структура — капсид имеет наименьшую свободную энергию по сравнению с неупорядоченными белковыми молекулами. Сборка капсидной оболочки из субъединиц запрограммирована в первичной структуре белка и происходит самопроизвольно или при взаимодействии с нуклеиновой кислотой.

Принцип субъединичности в строении вирусного капси­да является универсальным свойством капсидных белков и имеет огромное значение для вирусов. Благодаря этому свойству достигается огромная экономия генетического материала. Если бы капсидная оболочка была построена из разных белков, то на кодирование ее потребовалась бы основная часть генетической информации, заложенной в вирусном геноме. В действительности на кодирование, например, одной полипептидной цепи вируса табачной мозаики, расходуется менее 10 % генома. Далее, в меха­низме самосборки заложена возможность контроля за полноценностью вирусных полипептидов: дефектные и чу­жеродные полипептидные цепи при таком способе сборки вирионов будут автоматически отбрасываться.

Описанная способность к самосборке в пробирке и в зараженной клетке характерна только для простых виру­сов. Сборка сложно организованных вирусов является го­раздо более сложным многоступенчатым процессом, хотя отдельные ее этапы, например формирование капсидов и нуклеокапсидов, также основаны на самосборке.

Суперкапсидные белки. Гликопротеиды. Суперкапсидные белки, или пепломеры, располагаются в липопротеидной оболочке (суперкапсиде или пеплосе) сложно устроенных вирусов. Они либо пронизывают насквозь липидный бислой как, например, гликопротеиды альфа-вирусов (вируса леса Семлики), либо не доходят до внутренней поверхности. Эти белки являются типичны­ми внутримембранными белками и имеют много общего с клеточными мембранными белками. Как и последние, суперкапсидные белки обычно гликозилированы. Углевод­ные цепочки прикреплены к молекуле полипептида в опре­деленных участках. Гликозилирование осуществляют кле­точные ферменты, поэтому один и тот же вирус, проду­цируемый разными видами клеток, может иметь разные углеводные остатки: может варьировать как состав угле­водов, так и длина углеводной цепочки и место прикреп­ления ее к полипептидному ocтoвy.

У большинства вирусов гликопротеиды формируют «шипы» на поверхности вирусной частицы, длина которых достигает 7-10 нм. Шипы представляют собой морфоло­гические субъединицы, построенные из нескольких моле­кул одного и того же белка. Вирусы гриппа имеют два типа шипов, построенных соответственно из гемаглютинина и нейраминидазы. Парамиксовирусы также имеют два типа шипов, построенных соответственно из двух гликопротеидов (HN и F), рабдовирусы имеют только один гликопротеид и, соответственно, один тип шипов, а альфа-вирусы имеют два или три гликопротеида, формирующих один тип шипов.

Гликопротеиды являются амфипатическими молекула­ми: они состоят из наружной, гидрофильной части, кото­рая содержит на конце аминогруппу (N-конец), и погру­женной в липидный бислой, гидрофобной части, которая содержит на погруженном конце гидроксильную группу

Основной функцией гликопротеидов является взаимо­действие со специфическими рецепторами клеточной поверхности. Благодаря этим белкам осуществляется рас­познавание специфических клеточных рецепторов и прикрепление к ним вирусной частицы, т.е. адсорбция вируса на клетке. Поэтому гликопротеиды, выполняющие эту функцию, называют вирусными прикрепительными белка­ми.

Другой функцией гликопротеидов является участие в слиянии вирусной и клеточной мембран, т.е. в событии, ведущем к проникновению вирусных частиц в клетку. Ви­русные белки слияния ответственны за такие процессы, как гемолиз и слияние плазматических мембран соседних кле­ток, приводящие к образованию гигантских клеток, синцитиев и симпластов.

«Адресная функция» вирусных белков. Вирусы вызывают инфекционный процесс у относительно небольшого круга хозяев. Вирус должен «узнать» чувст­вительную клетку, которая сможет обеспечить продукцию полноценного вирусного потомства. Если бы вирус прони­кал в любую клетку, которая встретилась на его пути, это привело бы к исчезновению вирусов в результате деструк­ции «родительской» вирусной частицы и отсутствия вирус­ного потомства. В процессе эволюции у вирусов выраба­тывалась так называемая адресная функция, т.е. поиск чувствительного хозяина среди бесконечного числа нечув­ствительных клеток. Эта функция реализуется путем на­личия специальных белков на поверхности вирусной частицы, которые узнают специфический рецептор на по­верхности чувствительной клетки.

Вирусные прикрепительные белки. Прикрепительные белки могут находиться в составе уникальных органелл, таких как структуры отростка у Т-бактериофагов или фибры у аденовирусов, которые хорошо видны в электронном микроскопе; могут формировать морфологически менее выраженные, но не менее уникальные аранжировки белковых субъединиц на поверхности вирусных мембран, как, например, шипы у оболочечных вирусов, «корону» у коронавирусов.

Просто организованные вирусы животных содержат прикрепительные белки в составе капсида. У сложно организованных вирусов эти белки входят в состав суперкапсида и представлены множественными молекулами.

Неструктурные белки изучены гораздо хуже, чем структурные, поскольку их выделяют не из очищенных препаратов вирусов, а из зараженных клеток, и возникают трудности в их идентификации и очи­стке от клеточных белков.

К неструктурным белкам относятся:

1) предшественники вирусных белков, которые отлича­ются от других неструктурных белков нестабильностью в зараженной клетке в результате быстрого нарезания на структурные белки;

2) ферменты синтеза РНК и ДНК (РНК и ДНК-полимеразы), обеспечивающие транскрипцию и реплика­цию вирусного генома;

3) белки-регуляторы;

4) ферменты, модифицирующие вирусные белки, на­пример протеиназы и протеинкиназы.

Однако многие неструктурные белки при ряде вирус­ных инфекций еще не идентифицированы и функции их не определены.

Типы структурных и неструктурных белков просто и сложно устроенных вирусов и их функции показаны на схеме 1.

Антитела к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна – Барр (IgG) с определением авидности

Исследование авидности иммуноглобулинов класса G (IgG) к вирусу Эпштейна — Барр – метод обследования, позволяющий определить степень эффективности специфического взаимодействия между молекулами антител и антигенов, скорость образования иммунного комплекса и полноту нейтрализации антигенов. Данный анализ используется для дифференциальной диагностики недавних случаев инфекции и ранее перенесенных форм у людей с повышенным титром антител (IgG) в крови; дифференциальной диагностики с ангиной, заболеваниями системы кроветворения; установления причины лихорадки неясной этиологии.

Определение индекса авидности иммуноглобулинов класса G к VCA ВЭБ позволяет уточнить сроки инфицирования и дифференцировать первичную инфекцию от реактивации и паст-инфекции.

Метод исследования

Иммунохемилюминесцентный анализ — Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgG;

Иммуноферментный анализ — Определение авидности IgG к Epstein-Barr virus VCA.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирус Эпштейна – Барр (ВЭБ) – это ДНК-геномный вирус рода Lymphocryptovirus подсемейства Gammaherpesvirinae семейства Herpesviridae, имеет 4 основных антигена: ранний антиген (early antigen – ЕА), капсидный антиген (viral capcide antigen – VCA), мембранный антиген (membrane antigen – MA), ядерный антиген (Epstain-Barr Nuclea antigen — EBNA). Каждый из них образуется в определённой последовательности и индуцирует синтез соответствующих антител. ВЭБ поражает в основном два типа клеток: эпителий верхних дыхательных путей и пищеварительного тракта, а также В-лимфоциты, которые в результате инфицирования иммортализуются (становятся бессмертными). ВЭБ вызывает такие заболевания, как инфекционный мононуклеоз, злокачественная лимфома Беркитта, злокачественная носоглоточная карцинома. Вирус Эпштейна – Барр широко распространен в человеческой популяции. Как показали эпидемиологические исследования, инфицированность ВЭБ детей в возрасте до 5 лет в России составляет до 50 %, а взрослых – 95 %. Источником ВЭБ является больной человек или здоровый носитель. Вирус выделяется со слюной в продромальном периоде, в разгаре заболевания и при выздоровлении в период до 6 мес. Заражение здорового человека ВЭБ может осуществляться воздушно-капельным, контактно-бытовым и половым путями. Установлено, что он может передаваться при переливании донорской крови и других парентеральных вмешательствах. У людей без дефектов иммунной системы первичное инфицирование ВЭБ может протекать бессимптомно или вызывать субклинические проявления болезни с положительными серологическими реакциями. В дальнейшем вирус может длительное время персистировать в клетках хозяина в виде латентной инфекции. При массированном поступлении вируса или недостаточности иммунной системы развивается вирусемия, приводящая к острым формам заболевания. В процессе репликации вируса экспрессируется свыше 70 различных вирусоспецифических белков, однако к настоящему времени выделены группы иммуногенных белков, определение антител к которым дает возможность дифференцировать стадию инфекции. Наиболее специфичными и чувствительными маркерами ВЭБ-инфекции являются IgG и IgM к капсидному антигену (VCA), IgG к раннему антигену (ЕА) и IgG к ядерному антигену (NА).

Антитела к капсидному антигену (VCA-IgG) могут появиться очень рано (на 1-4-й неделе), обнаруживаются в большинстве случаев в начале заболевания, достигая пика ко 2-му месяцу. После выздоровления VCA IgG сохраняются пожизненно. Наличие VCA-IgG свидетельствует о перенесенной инфекции и о наличии иммунитета к вирусу. У детей до 7 лет антитела VCA-IgG могут не выявляться. Постоянное присутствие VCA-IgG в высоких титрах указывает на хроническую фазу инфекции. Отрицательный результат данного теста обычно исключает прошлую инфекцию, хотя не всегда исключает острую инфекцию, если анализ крови на вирус Эпштейна – Барр был произведен в раннем периоде острой фазы, когда VCA-IgG находятся ещё на неопределяемом уровне. Результат единичного теста сам по себе не может служить основанием для постановки диагноза, его следует рассматривать в комплексе с клиническими наблюдениями и данными других диагностических процедур.

Исследование авидности иммуноглобулинов класса G (IgG) к вирусу Эпштейна – Барр позволяет определить степень специфического взаимодействия между молекулами антител и антигенов.

Антитела, синтезированные клетками иммунной системы, обладают определенной способностью связываться с антигенами вируса. Прочность такого связывания антигенов с антителами называется авидностью – это общее свойство всех антигенов и антител, в том числе и вируса Эпштейна – Барр. Обычно авидность определяется для антител, принадлежащих к классу IgG, поскольку это позволяет определить длительность течения инфекции. Авидность антител других классов (IgМ) к вирусу Эпштейна – Барр не обладает клинической информативностью. Прочность связывания антигенов вируса Эпштейна – Барр и антител выражают индексом авидности, который обычно указывается в процентах и отражает, какое количество антител из их общего числа прочно связывается с антигенами вируса.

Для чего используется исследование?

  • Лабораторное подтверждение инфекции ВЭБ при клинических подозрениях на инфекционный мононуклеоз;
  • оценка стадии течения инфекции, лабораторное подтверждение диагноза при клинике хронического инфекционного мононуклеоза;
  • подтверждение этиологической роли вируса Эпштейна – Барр при лимфопролиферативных и онкологических заболеваниях, связываемых с вирусом Эпштейна – Барр.

Когда назначается исследование?

  • Комплексная диагностика острой инфекции ВЭБ и оценка стадии текущей инфекции;
  • при выявлении у пациента лихорадки, боли в горле, увеличении лимфоузлов шеи, увеличении селезенки, печени, кожной сыпи, повышенной утомляемости;
  • при симптомах гриппа у беременных женщин (наряду с тестами на цитомегаловирусную инфекцию, токсоплазмоз и др.);
  • если пациент (даже без симптомов инфекции) находился в тесном контакте с больным инфекционным мононуклеозом – для оценки напряженности иммунитета и восприимчивости к инфекции.

Что означают результаты?

Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgG

Референсные значения: отрицательно.

Отношение signal / cut off: 0 — 0,9.

Причины положительного результата:

  • наличие активного иммунитета вследствие ранее перенесенной инфекции (наряду с выявлением антител к ядерному антигену (EBNA) и отсутствием IgM к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна – Барр);
  • текущий или недавно перенесенный инфекционный мононуклеоз (в сочетании с выявлением IgM к капсидному антигену (VCA) и антител к ранним антигенам (EA-D) вируса Эпштейна – Барр);
  • реактивация вируса Эпштейна – Барр.

Причины отрицательного результата:

  • отсутствие инфекции, вызванной вирусом Эпштейна – Барр (IgM к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна – Барр не выявляются); если есть подозрение на инфекцию, целесообразно повторное определение IgG через 2-4 недели;
  • ранние стадии инфекционного мононуклеоза (при условии что выявляется повышение уровня IgM к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна – Барр) – повторить исследование в динамике через 14 дней;
  • низкое содержание вируса Эпштейна – Барр в крови;
  • отсутствие иммунного ответа или слабый иммунный ответ к вирусу Эпштейна – Барр вследствие нарушений в иммунной системе (IgM к капсидному антигену (VCA) вируса Эпштейна – Барр не выявляются).

Определение авидности IgG к Epstein-Barr virus VCA

Единицы измерения: результаты приводятся в виде индекса авидности (ИА), %.

Индекс авидности менее 60 % – низкоавидные антитела VCA-IgG. Наличие низкоавидных антител свидетельствует об острой стадии первичной инфекции либо о недавней (несколько недель) первичной инфекции в анамнезе.

Индекс авидности 60-70 % – пограничная авидность (серая зона). Пограничный результат ИА указывает на позднюю первичную либо раннюю паст-инфекцию.

Индекс авидности более 70 % – высокоавидные антитела VCA-IgG. Наличие высокоавидных VCA-IgG при отсутствии VCA-IgМ указывает на паст-инфекцию. Наличие высокоавидных VCA-IgG при наличии VCA-IgМ предполагает либо реактивацию вируса, либо позднюю первичную инфекцию.

На ранней стадии первичной инфекции IgG к VCA характеризуются низким индексом авидности (ИА). В течение нескольких недель происходит созревание антител и возрастание ИА. На стадии паст-инфекции в сыворотках крови пациентов выявляются уже высокоавидные IgG к VCA.



Кто назначает исследование?

Инфекционист, педиатр, ЛОР, гематолог, терапевт, врач общей практики.

Также рекомендуется

  • Epstein Barr Virus капсидный белок (VCA), IgM
  • Epstein Barr Virus, ДНК
  • Epstein Barr Virus ранние антигены (EA), IgG
  • Epstein Barr Virus ядерный антиген (EBNA), IgG (количественно)
  • HIV 1, 2 Ag/Ab Combo (определение антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена p24)

Литература

1. Набор реагентов для иммуноферментного определения индекса авидности иммуноглобулинов класса G к капсидному антигену VCA вируса Эпштейна-Барр в сыворотке (плазме) крови, ВектоВЭБ-VCA-IgG-авидность. — Инструкция по применению. – 2014г

2. Инфекционные болезни у детей. Ред. Д. Марри. М. Практика, 2006. — 928 с.