Чем отличается посев от ПЦР

Содержание

Что лучше: бакпосев или ПЦР?

Многие пациенты, которым врач выдал направление сразу на несколько разных анализов, на форумах в интернете задают один и тот же вопрос: что лучше – ПЦР или бакпосев? Как правило, мотивом становится нежелание платить за оба исследования, ведь ожидания пациента заключаются в подтверждении либо опровержении присутствия инфекции в организме.

Вопрос о том, какое из названных исследований лучше, не совсем корректен – эти методы сильно отличаются. Бактериологический посев подразумевает под собой исследование биологического материала, помещенного в питательную среду, благоприятную для роста микроорганизмов. Так можно не только выявить типы бактерий, но и определить их чувствительность к антибиотикам.

Для определения различных микроорганизмов производится забор материала практически с любого участка организма. Так, материалами для бакпосева на микроорганизмы, вызывающие ИППП, выступают соскобы с половых органов и мазки из урогенитального тракта. Чаще всего бакпосев назначается для диагностики таких ИППП, как трихомониаз, микоплазмоз, уреаплазмоз, хламидиоз и различные формы кандидоза.

Анализ методом ПЦР (полимеразной цепной реакции) позволяет обнаружить в забранном у пациента биологическом материале фрагменты ДНК, принадлежащие тому или иному виду бактерий. ПЦР-анализ является самым высокоэффективным методом обнаружения множества микроорганизмов, так как даже самое низкое число клеток возбудителя инфекции будет обнаружено.

Помимо очевидных преимуществ, оба вида анализа обладают и явными недостатками. Для бакпосева характерна высокая длительность исследования (от нескольких дней до нескольких недель, так как бактерии нужно выявить, а затем и вырастить), повышенные требования к забору биологического материала, а также повышенные требования к квалификации лаборантов. Все эти недостатки ведут к главному неудобству — к значительному удорожанию стоимости исследования и удлинению сроков лечения.

Метод ПЦР-диагностики автоматизирован и позволяет выявить инфекцию за 4-5 часов. При этом неважно, в какой стадии находится заболевание, анализ обнаружит присутствие даже единичных бактерий либо вирусов. Кроме того, мазок методом ПЦР выявляет возбудителей хламидиоза, уреаплазмоза, микоплазмоза и генитального герпеса, которые не обнаруживаются в мазке на флору.

Минусы метода ПЦР – это вероятность получения ложноположительного результата, возникающая по нескольким причинам. Например, если пациент недавно вылечил заболевание, вновь определившееся при ПЦР-анализе, то вполне вероятно, что исследование обнаружило уже мертвые, но еще не выведенные из организма клетки возбудителя. Противоположный результат – невыявленный возбудитель, который был определен другим анализом – возможен, если вирус или бактерия уже успели мутировать, и штаммы ПЦР не среагировали на «незнакомца». Кроме того, врачи стараются не назначать ПЦР-анализ на гарднереллез, так как присутствие небольшого количества этих бактерий во влагалище является нормой, и ПЦР их все равно определит.

С усовершенствованием метода ПЦР врачи все реже назначают пациентам прохождение бакпосева. Он считается незаменимым при наличии хронических форм ИППП, так как позволяет достаточно точно определить количество клеток возбудителя и его реакцию на антибиотики различных групп. Для определения острых форм инфекции более целесообразным является метод ПЦР-анализа.

В конечном итоге, каким бы ни был результат того или иного исследования, достоверно расшифровать и сделать назначения по нему может только врач.

Насчет ПЦР и посева, взято с сайта www.fikomed.ru
2. Бактериологическое исследование (посев, культуральный метод). Выращивание бактерий на питательных средах. Метод гораздо более чувствительный, чем микроскопия, потому что позволяет обнаружить возбудителя при его небольшой концентрации, когда он не попадает в мазок. Анализ берут опять же после вставления зеркала, под контролем глаза из канала шейки матки специальным стерильным тампоном. При Вас вскрывают одноразовую пробирку с тампоном (она заклеена заводским способом) и, ничего не касаясь, вводят тампон в канал шейки матки. Одно движение и, ничего не касаясь, тампон возвращают в пробирку и наглухо ее закрывают. Самое главное при взятии материала для посева — стерильность, чтобы попали бактерии именно из исследуемой области, а не из воздуха, кожи и т.д.
В лаборатории тампоном касаются питательной среды (желатин или агар-агар), на которой и растут бактерии. Обычный посев производится при доступе воздуха, т.е анаэробные (не использующие кислород) бактерии вырасти не могут. Их посев тоже возможен, но это специальное исследование, которое делается не во всех лабораториях. Для выращивания вирусов (герпес), хламидий также требуются специальные условия и среды (поскольку это внутриклеточные паразиты, то они не могут расти просто на питательном веществе, им нужна культура живых клеток. Поэтому в обычном посеве Вам не могут определить присутствие хламидий), это отдельные анализы.
Культуральный метод (бактериологический, бакпосев) — это т.н. «золотой стандарт» диагностики многих инфекций и основной метод контроля эффективности лечения. Он гораздо чувствительнее и специфичнее (см. ниже) обычного мазка и имеет преимущества перед ДНК-диагностикой (ПЦР). Дело в том, что важно не обнаружение микроба, а доказательство того, что именно он является возбудителем инфекции, а это не одно и то же. В организме часто присутствуют микроорганизмы, т.н. «условные патогены» (например, гарднереллы), которые в норме не вызывают болезни, а при снижении иммунитета, развитии дисбактериоза — могут вызывать. Их обнаружение не доказывает их роли в развитии инфекции. А вот их рост на питательных средах говорит о том, что они, во-первых, жизнеспособны (могут вырасти и вызвать болезнь), во-вторых, многочисленны (отдельные микроорганизмы подавляются теми, кого больше, и тогда на среде вырастает не возбудитель инфекции, а нормальная флора). Еще одно преимущество бактериологического исследования заключается в том, что оно позволяет посчитать количество возбудителя (по числу выросших колоний), а также определить чувствительность к антибиотикам (в питательную среду добавляют разные антибиотики и смотрят, от какого препарата бактерии гибнут). Единственным недостатком метода является длительность его исполнения (бактерии растут несколько дней) и требовательность к лаборатории.
3. ДНК-диагностика (ПЦР) . К ДНК-диагностике относят несколько методов, но самый распространенный — полимеразная цепная реакция (ПЦР). Это обнаружение в материале ДНК возбудителя. ДНК — это молекула, в которой заключена вся информация о клетке. В клетках организмов одного вида (например, микоплазма генитальная) определенные участки ДНК одинаковые. Поэтому, зная строение этих участков у основных возбудителей, можно создать зеркальные копии, которые будут находить и связываться с ними. Нахождение даже одного такого участка достаточно для того, чтобы ПЦР была положительной. Это говорит о крайне высокой чувствительности метода.
Метод хорош для диагностики инфекций, не обнаруживаемых в мазках: хламидиоза, генитального герпеса. Однако для определения эффективности лечения тех же заболеваний метод неприемлем, т.к. и после распада клеток в организме могут остаться кусочки ДНК. Признаком неизлеченности могут служить только жизнеспособные размножающиеся микроорганизмы, а их можно обнаружить только с помощью посева. Однако не все желаемые методы доступны. Внутриклеточных паразитов в обычном посеве определить нельзя, и если в лаборатории не делают специального бактериологического исследования на культуре клеток — приходится довольствоваться ПЦР — тогда его надо сдавать не раньше чем через 3-4 недели после окончания лечения
Также нежелательно использоваться метод ПЦР для диагностики гарднереллеза, т.к. эти бактерии и в норме содержатся во влагалище. Их не должно быть в мазке, и в данном случае бактериоскопия — достаточный метод для диагностики гарднереллеза и контроля лечения. А ДНК этих бактерий может и должна находиться, это не есть критерий болезни.
Положительный результат ПЦР на уреаплазму (биовары) и микоплазму не является критерием диагностики и лечения — см. статью Микоплазмы и уреаплазмы
Материал для ПЦР берут из канала шейки матки, иногда — из наружного отверстия мочеиспускательного канала специальной стерильной одноразовой щеточкой. Перед взятием материала обязательно удаляют слизь и выделения ватным тампоном, невыполнение этого правила часто ведет к ложным результатам. Большинство исследуемых микроорганизмов — внутриклеточные паразиты, поэтому для их обнаружения необходим соскоб клеток, а не выделения, которые мешают добраться до эпителия. Затем материал со щеточки помещают в контейнер с физраствором, который до выполнения анализа должен храниться в холодильнике. Главное — соблюдение стерильности.
Причины ложных результатов ПЦР:
1. Несоблюдение правил забора материала — неудаление слизи из канала шейки матки. Самая частая причина. Вы не можете ее контролировать. Единственное, что Вы можете — выбрать врача-гинеколога, которому доверяете.
2. Несоблюдение правил постановки ПЦР в лаборатории. Эту причину вы тоже не можете контролировать, она лежит на совести лабораторий.
3. Опять же несоблюдение правил взятия материала — попадание в материал ДНК бактерий из воздуха, с рук, покровного стекла (почему-то часто материал на ПЦР сдается в виде обычного мазка на стекле. Это неправильно, ведь стекло не может быть стерильным). Стерильность может быть нарушена и в лаборатории, если посторонние люди будут часто ходить вокруг рабочего образца и «насыплют» разные ДНК со своей одежды. Это вы тоже никак не проверите.
Поэтому, несмотря на то, что ПЦР — самый чувствительный и специфичный метод диагностики, у него есть свои недостатки. Результаты должны быть проанализированы лечащим врачом с учетом возможности всего вышесказанного. Диагноз ставится на основании жалоб и симптомов. Любой диагностический метод -вспомогательный, на него нельзя 100%-но полагаться.
4. Определение антител в крови (серологический метод) — чаще всего методом ИФА (иммуноферментный анализ). . Дополнительный метод диагностики, позволяющий отличить острое заболевание, его первый эпизод от обострения хронической инфекции. Особенно часто этот метод используется у беременных после обнаружения возбудителя методом ПЦР для определения вероятности заражения ребенка. Наиболее опасна для организма и наиболее часто передается ребенку именно первичная инфекция (первое попадание возбудителя), когда иммунная система еще не встречалась с этим микроорганизмом и не имеет опыта борьбы с ним. В ответ на попадание возбудителя в кровь образуются антитела — вещества, которые связываются с ним и стараются вывести из организма. При первичной инфекции вырабатываются антитела одного класса — т.н. иммуноглобулины М. Их нахождение в крови говорит о том, что организм болеет, и является показанием для лечения инфекции. Позднее начинают вырабатываться другие антитела — иммуноглобулины класса G. Они сохраняются и после излечения, для некоторых инфекций (например, краснуха) — навсегда. Нахождение в крови иммуноглобулинов G говорит о том, что организм раньше встречался с инфекцией и выработал против нее иммунитет, это благоприятный признак, он не требует лечения. Одновременное присутствие обоих классов иммуноглобулинов говорит об обострении хронической инфекции и требует лечения. При нахождении только иммуноглобулинов G и подозрении на инфекцию (признаки внутриутробной инфекции плода) через 2 недели делают повторный анализ с определением титра (количества) антител. Резкое возрастание титра (в 4 раза) говорит об активации инфекции и требует лечения.
Определение антител в крови к основным возбудителям (токсоплазма, краснуха, цитомегаловирус, герпес) у беременных называется TORCH-комплекс. Для всех этих инфекций очень важно, болела ли женщина ими раньше, т.е. есть ли у нее в крови иммуноглобулины G. Если нет, то есть вероятность развития первичной инфекции во время беременности и поражения плода. В этом случае нужно более тщательно беречься от возможного заражения и регулярно перепроверять содержание антител.
Антитела к герпесу . Чаще всего, если на бланке не указывается отдельно — антитела к ВПГ1 и ВПГ 2 (и не берется двойная цена) — берут кровь на определения смешанных антител к обоим типам вируса. А так как герпесом 1 типа мы почти все переболели в детстве, 98% взрослого населения имеет к нему антитела, и анализ будет положительным, даже если Вы никогда не болели генитальным герпесом. Поэтому этот анализ почти не имеет ценности и на нем можно сэкономить деньги. Единственное показание — Вы беременны, и Вам кажется, что и 1 типа герпеса (лихорадки на губах) у Вас никогда не было. Тогда проводят этот анализ, и если действительно антител нет вообще, то тем более надо предохраняться от возможного заражения даже этим «безобидным» герпесом 1 типа, т.к. и его первичная инфекция может повредить плоду. (В Москве есть лаборатории, которые делают АТ к ВПГ 2 типа без АТ к ВПГ 1 типа, но, ввиду высокой стоимости импортных реагентов, такие анализы — редкость).
Для определения антител берут кровь из вены. Опять же многое зависит от уровня лаборатории и качества реактивов.

Зачем может потребоваться сдача крови на ПЦР

Надежный, быстрый и высокочувствительный метод диагностики, способный идентифицировать возбудителей различных инфекционных заболеваний, выявляя их генетический материал (ДНК или РНК) в пробах, полученных от обследуемого пациента, называется полимеразной цепной реакцией (ПЦР).

Анализ ПЦР (полимеразной цепной реакции) был впервые разработан американцем Кэри Мюллисом в 1983-м году. Методика была сразу же запатентована компанией «Цетус Корпорейшн». В 1992-м патент был продан компании «Хоффман-Ля Рош», но в итоге оказалось, что многие ученые из разных стран вели одновременно работу в этом направлении, внесли свой вклад в разработку новой технологии выявления возбудителей инфекционных заболеваний.

В свое время многими учеными метод ПЦР был назван «революционным» прорывом для вирусологов и инфекционистов, дав возможность получить результат анализа за считанные часы, а не ожидая информации днями и неделями, как это требовалось ранее.

Суть метода ПЦР

Суть метода полимеразной цепной реакции заключается в многократном увеличении самых ничтожных концентраций фрагментов ДНК в любой пробе. Для этого:

  1. В специальный реактор помещается небольшое количество биологического материала в пробирке (слюна, кровь, моча, выделения из половых органов), в котором могут находиться фрагменты ДНК микроорганизма.
  2. К этому материалу добавляются специальные ферменты, которые связываются с ДНК микроорганизма, синтезируя ее копию.
  3. Реакция копирования ДНК проходит по принципу цепной реакции, в несколько этапов:
    • из 1 молекулы ДНК образуются 2 новые молекулы;
    • второй этап — из имеющихся 2 молекул образуются 4 новые;
    • после ряда циклов, вместо 1 копии ДНК, готовы для исследования несколько сотен/тысяч копий.

Достаточное число копий ДНК вируса/микроорганизма легко поддается исследованию. Полученный результат сравнивается с базой данных, в которой имеется информация о строении ДНК различных микробов, неважно, то ли проводится анализ ПЦР на ИППП (инфекции передающиеся половым путем), то ли на гепатит или туберкулез, вирусы, даже ВИЧ.

Преимущества ПЦР перед иными способами диагностики

К явным преимуществам, которые демонстрирует анализ ПЦР на ИППП, надо отнести точность и избирательность полученных результатов, поскольку реактив при ПЦР подходит к ДНК инфекции в точности, как ключ к замку — на каждый возбудитель заболевания имеется свой реактив. Тот же бакпосев признается не менее чувствительным методом, известным уже давно, отработанным до мелочей, пусть и более хлопотным. Однако по срокам выполнения посев заметно проигрывает молекулярным методам диагностики.

Даже тот факт, что для каждого возбудителя нужна своя питательная среда, а для хламидий, к примеру, она очень дорогая, нельзя рассматривать как решающий фактор, определивший распространенность анализа, в то как от пациента требуется лишь сдать соскоб из уретры на ПЦР.

Многие специалисты указывают на ряд факторов, отмечая, чем отличается бак посев от ПЦР, поскольку бактериологическое лабораторное исследование всегда «показывает» только живого возбудителя, демонстрируя эффективность проведенного лечения. Даже использование иммуноферментного анализа (ИФА), когда в крови определяются специфические антитела или антигены на определенный возбудитель, не может гарантировать 100% объективность информации.

Как оказалось, существующее отличие ИФА от ПЦР не дает возможность признать иммуноферментный метод лучшим, поскольку те же самые хламидии вызывают ответную реакцию иммунной системы человека в виде выработки антител IgA,IgM,IgG, а последнии сохраняются в крови в течение года после полного излечения, что и обуславливает неоднозначные, на первый взгляд, результаты лабораторных исследований — ИФА положительный ПЦР отрицательный (антитела имеются, а ДНК микроорганизма нет, т.к. пациент уже излечен).

К тому же, ослабленная сильными инфекциями иммунная система может с запозданием начать вырабатывать определяемые ИФА антитела либо вообще их не вырабатывать. В этом случае результаты анализа звучат следующим образом — ИФА отрицательный ПЦР положительный, что свидетельствует о начале заболевания, хоть и нет еще клинико-лабораторных его проявлений.

Пациентам предлагается сдать кровь на ПЦР, поскольку данный метод имеет следующие преимущества перед существующими технологиями определения скрытых до поры инфекций:

  1. Высокая чувствительность метода. Имея всего несколько молекул ДНК микроорганизма, специалисты лаборатории, проводя анализ ПЦР, определяют наличие инфекции, что крайне важно при диагностировании хронических, латентно протекающих патологий. В ряде случаев, когда микроорганизм является некультивируемым иными способами, подобный анализ является единственным объективным методом выявления возбудителя.
  2. Для качественного и быстрого исследования подходит любой биологический материал (слюна, кровь, волосы, выделения из половых органов, клетки эпителия).
  3. Автоматизированный процесс позволяет получить результаты исследования спустя 4-5 часов. Существует даже наиболее современный метод ПЦР real time, когда визуальная оценка результатов ПЦР, для чего применялся метод электрофореза, сменяется флуоресцентными методами детекции продуктов амплификации. В результате применения модифицированного метода анализа — получение и интерпретация результатов анализа становится проще, быстрее, да и надежнее.
  4. Несмотря на универсальность метода, на его основе разрабатываются и более специализированные технологии, благодаря чему при исследовании урогенитального тракта женщин опытный врач не задумывается о том, какое лабораторное обследование назначить — фемофлор или ПЦР. Именно фемофлор, базирующийся на использовании полимеразной цепной реакции, признается лучшим методом, благодаря которому ПЦР диагностика урогенитальных инфекций дает точную качественную и количественную картину условно-патогенной и нормальной картины женского урогенитального тракта в режиме «реального времени».
  5. Врач получает возможность определить несколько видов возбудителей при сдаче пациентом лишь 1 пробы материала для анализа. Это ускоряет процесс диагностики заболевания, кардинально снижает материальные затраты на лабораторные исследования.
  6. Количественный анализ ПЦР также признается важным фактором, определяющим достоинства проведения диагностики скрытого заболевания с помощью метода полимеразной цепной реакции — для оценки эффективности лечения многих хронических инфекций.

Существуют однако и особенности, чем отличается ПЦР качественный от количественного, поскольку от специалиста требуются дополнительные манипуляции направленные на своевременное завершение полимеразной цепной реакции.

В противном случае, на конечной фазе насыщения, когда полученных в результате ПЦР копий становится слишком много, ограничивающими звеньями реакции становятся как субстраты (дезоксирибонуклеозидтрифосфаты), так и сам фермент. Ведь для его молекул становится слишком много матричной ДНК в виде продуктов полимеразной цепной реакции. В этих условиях завершение очередного этапа ПЦР уже не сопровождается удвоением количества копий ДНК/РНК, но происходит нивелирование небольших количественных отличий между ранними и поздними пробами, хоть на начальных этапах ПЦР достаточно четко выявляются различия.

Вышеизложенное свидетельствует, что оснащение лаборатории, уровень подготовки специалистов, должны соответствовать установленным стандартам.

Ведь для количественного определения микроорганизмов требуются даже праймеры либо дезоксирибонуклеозидтрифосфаты, меченные флуоресцентной или даже радиоактивной меткой. Требования к оснащению и поддержанию санитарно-гигиенического режима в ПЦР-лабораториях не уступают хирургической операционной. ПЦР-лабораторию, в соответствии с «Методическими указаниями МУ 1.3.1888-04» оборудуют водопроводом, канализацией, электричеством и отоплением. Все помещения ПЦР-лаборатории обеспечивают достаточным естественным и искусственным освещением, выделяют при этом:

  • зону приема, регистрации, разбора и первичной обработки материала;
  • зону выделения ДНК/РНК в отдельном помещении;
  • зону приготовления реакционных смесей и проведения ПЦР;
  • зону детекции продуктов амплификации.

Создаваемая приточно-вытяжная либо вытяжная вентиляция, хоть и допускается установка кондиционеров, предполагает 5-6 м³/час притока воздуха и 6-7 м³/час на вытяжку. При нарушении правил обустройства ПЦР-лаборатории результаты анализа могут быть ложноположительными.

Как правильно подготовиться к анализу?

Чтобы получить достоверные результаты ПЦР исследований, рекомендуем провести предварительную подготовку к такой диагностике:

  1. Перед сдачей слюны необходимо воздержаться от приема пищи, а также лекарств за 4 часа до проведения забора материала. Непосредственно перед самой процедурой необходимо прополоскать рот кипяченой водой. Эти же правила следует соблюдать и при взятии образца для анализа с внутренней поверхности щеки. Проведя полоскания ротовой полости необходимо немного помассировать кожу в области щеки для выделения секрета железы.
  2. Моча для анализа обычно собирается в домашних условиях. Правильная подготовка к сдаче ПЦР мочи заключается в следующем — необходимо провести тщательный туалет половых органов, а затем в стерильный пластиковый контейнер собирается 50-60 мл средней порции мочи. Для обеспечения чистоты материала подготовка к анализу ПЦР для женщин предполагает введение тампона во влагалище. Мужчинам следует обязательно открыть головку полового члена. Нельзя сдавать материал для ПЦР анализа в период менструальных выделений.
  3. Перед сдачей спермы – следует воздержаться от полового акта в течение 3 дней до забора материала. Советуем отказаться от посещения сауны, даже принятия горячей ванны, употребления острой пищи и алкоголя. А за 3 часа до анализа нужно помочиться, чтобы в последующем воздержаться от мочеиспускания.
  4. При сдаче урогенитального мазка – женщинам и мужчинам необходим отказ от половой жизни в течение 3 дней.
  5. Нельзя проводить ПЦР после антибиотиков — за 2 недели до анализа следует отказаться от приема антибактериальных препаратов.
  6. За неделю до анализа — необходимо прекратить использование интимных мазей, гелей, влагалищных свечей и спринцевание. За 3 часа до исследования — воздержаться от мочеиспускания. Во время менструации забор не проводится — спустя 3 дня после прекращения кровяных выделений можно брать урогенитальный мазок для полимеразной цепной реакции.
  7. ПЦР во время беременности имеет свои особенности. Поскольку в период вынашивания любая инфекция может причинить вред плоду, особенно вызываемая ИППП, настоятельно рекомендуется на раннем сроке беременности пройти обследование, чтобы установить наличие либо отсутствие патологии, которая может привести к выкидышу, преждевременным родам. Сдается анализ при постановке на учет, при сроке беременности — до 12 недель.

Диагностика инфекций: ПЦР, микробиологические посевы, антитела, АСЛО, анализ ликвора и спермы

Наша клиника уже много лет успешно лечит пациентов с инфекциями нервной, желудочно-кишечной и респираторной системы, урогенитальными инфекциями, инфекциями костей и суставов, а также с ревматическими процессами на фоне инфекций. Мы можем предложить Вам широкий спектр лабораторных исследований на инфекции, в т.ч. – серологическую диагностику (исследование антител к инфекциям).

  • Диагностика инфекций с помощью ПЦР. ПЦР – полимеразная цепная реакция
  • Микробиологические посевы
  • Антитела к инфекциям
  • Анализ на стрептококковую инфекцию. Антистрептолизин-О (АСЛО)
  • Анализ ликвора на нейроинфекции. Исследование цереброспинальной жидкости на вирусы, бактерии, грибы
  • Анализ спермы на вирусы, бактерии, грибы. Исследование секрета простаты и эякулята на вирусы, бактерии, грибы

Диагностика инфекций с помощью ПЦР. ПЦР – полимеразная цепная реакция

ПЦР или полимеразная цепная реакция — это метод исследования, на предмет наличия какой-либо инфекции путем поиска фрагментов ДНК этой инфекции.

Что можно проверить с помощью ПЦР. С помощью ПЦР можно исследовать различный материал: это кровь, кал, отделяемое глаз, носа, пунктат, биоптат, слюна, мазок, внутрисуставная жидкость, цереброспинальная жидкость. Т.е. биоматериалом для ПЦР-исследования может быть практически любая среда организма, где возможно присутствие микробов.

В чем отличие ПЦР от микробиологических посевов. В отличие от бактериологических посевов, ПЦР-исследование менее «капризно» к технологии выполнения. В ряде случаев ПЦР дает больше информации т.к. не каждый микроб растет на искусственных средах хорошо и бактериологические посевы часто получаются ложноотрицательными. Метод ПЦР чувствителен при диагностике туберкулеза, сифилиса, хламидий, микоплазм и других, плохо растущих на питательных средах инфекций.

Для интерпретации результатов ПЦР-исследования мы можем предложить Вам помощь врача-иммунолога, ЛОР врача, уролога, гинеколога, дерматовенеролога, офтальмолога или другого профильного специалиста.

В большинстве случаев, взятие биоматериала для ПЦР исследования производится врачом, но в некоторых случаях медсестрами.

Микробиологические посевы

Что такое микробиологический посев. Микробиологический посев – это исследование, при котором какой-либо биоматериал (кровь, моча, слизь, гной и т.д.) переносится из организма на питательную среду, и если в перенесенном биоматериале есть микробы, то они вырастают в этой среде. В ряде случаев мы совмещаем микробиологические посевы с ПЦР (полимеразная цепная реакция) исследованием, потому что не все микробы хорошо растут на средах, но легко выявляются методом ПЦР, и наоборот, некоторые микробы плохо определяются при ПЦР, но хорошо растут на питательных средах. Для определения вирусных инфекций широко применяется именно ПЦР.

Какие биоматериалы организма можно проверить на питательных средах. В нашей клинике вы можете выполнить посев практически любых биоматериалов: это отделяемое глаза и носа, материал полученный при пункции, слюна, различные мазки, мокрота, кал, моча, кровь, соскобы с кожи, волосы (при наличии инфекции волосяного покрова), ногти и др.

По готовности микробиологического посева может быть определена чувствительность высеянных микробов к различным антибиотикам. После определения чувствительности будет точно ясно, какой препарат будет подходить для лечения. Так же возможно определить чувствительность микробов к бактериофагам, в том случае, когда требуется проведение лечения без применения антимикробных химиопрепаратов.

Антитела к инфекциям

Что такое антитела? Антитела — это специфические белки, которые выделяет иммунная система в ответ на внедрение микроба в организм. Поскольку каждая разновидность грибка, вируса, бактерии, паразита имеют свою уникальную молекулярную антигенную структуру, то иммунная система вырабатывает антитела к каждому антигену каждого микроба. Обычно, в клинической практике, определяется несколько разновидностей антител к микробам (к вирусам, грибкам, бактериям): антитела IgA, IgM и IgG.

Антитела Ig G – эти антитела могут говорить, как о текущей инфекции, если она протекает длительно, так и о перенесенной инфекции. При повышении антител Ig G к любому микробу или вирусу всегда возникает вопрос, это перенесенная или текущая инфекция? На этот вопрос можно ответить с помощью других методов исследования, например, с помощью исследования IgM и IgA, а также с помощью других методов исследований, таких как ПЦР , микробиологический посев и т.д.

Антитела Ig M – это антитела иммунного ответа, которые повышаются при остром воспалении, т.е. при первичном попадании инфекции в организм, либо при обострении хронической инфекции. При обострении хронической инфекции, IgM повышается не всегда, это зависит от типа возбудителя, от давности воспалительного процесса, а также от особенностей иммунной системы пациента.

Антитела Ig A – это антитела, которые в основном повышаются при воспалительных процессах на слизистых оболочках. Они могут быть повышены как при острой, так и при хронической инфекции. Высокий уровень IgA к микробу или вирусу обычно отражает активное течение инфекции.

РПГА (реакция пассивной гемагглютинации) – метод исследования близкий к определению антител, основанный на определении агглютинации (склеивание и выпадение в осадок) эритроцитов. РПГА часто используется для определения сальмонеллы, иерсинии, шигелл, бледных трепонем (сифилиса).
Использование других антител применяется при различных специфических инфекциях, например, при бруцеллезе, сифилисе, бореллиозе и других серьёзных инфекциях.

Иммуноблот и иммуночип – это определение большого количества антител к различным антигенам одного микроорганизма. Целесообразно исследовать иммуноблот или иммуночип в сомнительных случаях, когда инфекция протекает скрыто и, и её диагностика затруднена с помощью обычного исследования IgG, IgM, IgA. Например, иммуноблот и иммуночип, актуальны при диагностике бореллиоза, который может протекать скрыто и плохо диагностироваться, сифилиса и хеликобактерной инфекции.

Для чего нужно определять антитела к инфекциям? Определив количество и набор этих антител можно судить, контактировала ли иммунная система с данной инфекцией, есть ли сейчас контакт с данной инфекцией и есть у иммунной системы антитела к инфекции или нет. Полученные данные анализов используются для интерпретирования текущего состояния пациента и для постановки клинического диагноза, также эти данные используются для оценки проводимого лечения.

Анализ на стрептококковую инфекцию. Антистрептолизин-О (АСЛО)

то такое антистрептолизин О (АСЛО)? Антистрептолизин О (АСЛО) – это маркер стрептококковой инфекции в организме. При попадании в организм человека, стрептококк группы А начинает вырабатывать антиген (чужеродный для организма человека белок) – стрептолизин, а иммунная система, для защиты организма, начинает вырабатывать антитела к этому антигену – антистрептолизин О (АСЛО). Повышенный антистрептолизин О (АСЛО) говорит о перенесенной стрептококковой инфекции, о ревматическом заболевании, спровоцированном стрептококком, или риске ревматического заболевания. Обычно, по уровню АСЛО в крови можно определить, когда человек болел стрептококковой инфекцией: уровень антистрептолизина О увеличивается спустя 1 неделю после инфекции и достигает своего пикового значения через 4-5 недель. При хронической стрептококковой инфекции (чаще это хронический тонзиллит при неудовлетворительных результатах лечения) высокий уровень АСЛО может держаться месяцы и годы.

Что делать при обнаружении высокого антистрептолизина О:

  1. Обратиться к ЛОР-врачу (оториноларингологу), т.к. в большинстве случаев источник стрептококковой инфекции – миндалины или аденоиды. Правильное лечение хронического тонзиллита и аденоидита в большинстве случаев решает проблему повышенного АСЛО и ревматического риска.
  2. Получить консультацию врача ревматолога, возможно проверить органы-мишени ревматизма (сердце, почки, суставы, нервную систему).

Для чего нужен анализ на антистрептолизин О (АСЛО)? Анализ антистрептолизина О применяется для диагностики ревматологических заболеваний и их риска при стрептококковой инфекции. При лечении хронического тонзиллита от уровня АСЛО зависит тактика лечения. Уровень АСЛО в крови особенно важен для дифференциальной диагностики ревматизма и ревматоидного артрита (при истинном ревматизме антистрептолизин О повышается гораздо чаще и выше).

Где сдать анализ на антистрептолизин О (АСЛО)? В нашей клинике Вы можете сдать кровь на антистрептолизин О семь дней в неделю. Мы рекомендуем сдавать кровь утром натощак, а накануне, по возможности, избегать переедания.

Основные показания к анализу на антистрептолизин О (АСЛО):

  • Обследование на ревматизм, ревматоидный артрит и другие ревматические заболевания, ревматическое поражение сердца – миокардит и почек – гломерулонефрит
  • Хронический тонзиллит
  • Любая стрептококковая инфекция (рожа, отит, скарлатина и т.д.)

Анализ ликвора на нейроинфекции. Исследование цереброспинальной жидкости на вирусы, бактерии, грибы

Наша клиника специализируется в неврологии, нейроиммунологии и лечении аутоиммунных заболеваний нервной системы. Исследование ликвора на нейроинфекции – один из самых достоверных методов лабораторной диагностики воспалительных и аутоиммунных заболеваний нервной системы. Мы предложим Вам исследование ликвора на нейроинфекции в амбулаторном режиме, с пребыванием в палате дневного наблюдения. Подробнее о процедуре получения ликвора.

Ряд исследований на нейроинфекции можно выполнить и с помощью исследования крови:

Какие именно нейроинфекции доступны для исследования в нашей клинике:

Хламидия трахоматис / Chlamydia trachomatis ПЦР

Вирус простого герпеса 1 и 2 типов / Herpes simplex virus I, II ПЦР

Возбудитель сифилиса / Treponema pallidum ПЦР

Цитомегаловирус / Cytomegalovirus ПЦР

Вирус Эпштейн-Барр / Epstein Barr virus ПЦР

Вирус герпеса 6 типа / Human herpes virus VI ПЦР

Возбудитель туберкулеза / Mycobacterium tuberculosis complex ПЦР

Листерия / Listeria monocitogenes ПЦР

Токсоплазма / Toxoplasma gondii ПЦР

Микроскопическое исследование окрашенного мазка (бактериоскопия)

Посев на микрофлору и определение чувствительности к антибиотикам

Посев ликвора на менингококк

Посев на грибы рода кандида и определение чувствительности к антимикотическим препаратам

Посев на анаэробную микрофлору и определение чувствительности к антибиотикам

Посев на гонококк и определение чувствительности к антибиотикам

Серологическая диагностика клещевого боррелиоза методом иммуночипа (кровь + СМЖ)

Энтеровирус / PHK Enterovirus ПЦР

Вирус Варицелла-Зостер (возбудитель опоясывающего лишая) / Varicella-Zoster ПЦР

Аденовирус / Adenovirus (группы В, С, Е) ПЦР

Исследование ликвора помогает провести дифференциальную диагностику между нейроинфекцией и демиелинизирующим заболеванием, нейросаркоидозом, нейролейкозом и т.д. Исследование ликвора помогает диагностировать нейроборрелиоз в сомнительных случаях. Также возможно исследование ликвора на наличие олигоклональных антител Igg для диагностики рассеянного склероза.

Проведение люмбальной пункции. Люмбальная пункция – это метод получения ликвора для лабораторного исследования. Более подробную информацию о люмбальной пункции Вы можете узнать здесь.

Для выполнения люмбальной пункции нам могут понадобиться:

  • МР-томография головного мозга. Если у Вас есть снимки головного мозга давностью не более 3х месяцев, пожалуйста, принесите их в клинику. Это важно для Вашей безопасности: возможны риски.
  • Осмотр врачом неврологом. Врач, который будет делать люмбальную пункцию, должен точно знать показания к этому исследованию в Вашем случае и понимать возможные риски.

Анализ спермы на вирусы, бактерии, грибы. Исследование секрета простаты и эякулята на вирусы, бактерии, грибы

Наша клиника занимается диагностикой, лечением и профилактикой болезней мочеполовой системы. Анализ спермы и/или секрета простаты на инфекции – достоверный метод лабораторной диагностики воспалительных заболеваний мочеполовой системы. При простатите, везикулите, болезнях яичек, мужском бесплодии исследование спермы на инфекции более достоверно, чем обычный мазок или анализ мочи. Мы предложим Вам сдать анализ спермы на вирусы, бактерии и грибы 7 дней в неделю. .

Возможно исследование спермы методом ПЦР и бактериологического посева.

Какие именно инфекции доступны для исследования в нашей клинике:
ПЦР:

Кандида альбиканс / Candida albicans ПЦР

Хламидия трахоматис / Chlamydia trachomatis ПЦР

Цитомегаловирус / Cytomegalovirus ПЦР

Вирус Эпштейн-Барр / Epstein Barr virus ПЦР

Гарднерелла вагиналис / Gardnerella vaginalis ПЦР

Вирус простого герпеса 1 и 2 типов / Herpes simplex virus I, II ПЦР

Вирус герпеса 6 типа / Human herpes virus VI ПЦР

Микоплазма гениталиум / Mycoplasma genitalium ПЦР

Микоплазма хоминис / Mycoplasma hominis ДНК

Нейссерия гонореи / Neisseria gonorrhoeae ПЦР

Трихомонада вагиналис / Trichomonas vaginalis ПЦР

Уреоплазма парвум / Ureaplasma parvum ПЦР

Уреоплазма уреалитикум / Ureaplasma urealyticum ПЦР

Бактериологический посев спермы: любая бактериальная флора, поддающаяся культивации на стандартной питательной среде.

Расшифровкой результатов анализа спермы на инфекции, обычно, занимается врач уролог-андролог, дерматовенеролог или иммунолог. При необходимости, мы предложим Вам консультацию врача соответствующей специальности.

Исследование спермы на инфекции помогает выяснить причину хронических, рецидивирующих болезней мочеполовой системы. В некоторых случаях, после подтверждения вирусной природы хронического простатита и назначения адекватного лечения, можно добиться значительного прогресса в лечении болезни без хирургического вмешательства.

При обращении в нашу клинику с проблемой мужского бесплодия, мы рекомендуем сдавать анализ спермы на вирусы, бактерии и грибы. Наш опыт лечения мужского бесплодия показывает, что часто к бесплодию приводят инфекции мужских половых органов, включая цитомегаловирус и вирус герпеса 6 типа.

Где сдать анализ спермы на инфекции. Мы предложим Вам сдать анализ спермы на вирусы, бактерии и грибы 7 дней в неделю в нашей клинике.

Как сдавать сперму на инфекции. Перед сдачей спермы (эякулята) на исследование, рекомендуется половое воздержание в течение 3-5 дней. Собрать эякулят (сперму) для исследования на вирусы, бактерии и грибы Вы можете в комфортных условиях дома, в стерильный контейнер, который мы Вам выдадим. Важно доставить полученный образец эякулята в клинику в течение 4х часов.

Основные показания к сдаче спермы (эякулята) на вирусы, бактерии и грибы:

  • Простатит
  • Эпидидимит
  • Орхит
  • Бесплодный брак
  • Выявление мужского бесплодия с нарушением сперматогенеза
  • Хламидиоз, микоплазмоз, инфекция вирусами герпес-группы
  • Хронический цистит
  • Хронический уретрит
  • Хроническая тазовая боль
  • Подготовка к ЭКО (экстракорпоральному оплодотворению)

ПЦР: какие болезни помогает выявить и на чем основывается

Зачастую пациенты при обследовании у уролога, гинеколога, венеролога и врачей других специальностей получают направление на ПЦР. Что это такое, знают немногие. Разберемся, на чем основывается этот анализ, при каких заболеваниях назначается и как его сдать правильно, чтобы получить достоверный результат.

Что такое ПЦР метод

ПЦР (полимеразная цепная реакция) — диагностический метод, который позволяет обнаружить в человеческом организме ДНК возбудителей заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП). Эта методика также применяется для установления отцовства, выявления наследственных патологий. Ее используют для экспериментов при клонировании и для определения новых генов.

Анализ ПЦР основывается на взятие различных жидкостей из организма в качестве биологического материала. Он позволяет увеличить количество ДНК на одном участке в 2 раза при помощи специальных ферментов. Благодаря этому удается получить больше информации для подтверждения присутствия патогенного микроорганизма в биоматериале. Это позволяет обнаружить даже скрытое заболевание.

У пациентов часто диагностируют ИППП методом ПЦР. Зачастую инфекции, передаваемые половым путем, протекают без выраженной симптоматики. Их возбудителей сложно выявить при помощи других исследований, т.к. они обладают низкой чувствительностью к патогенам. А ПЦР способна определить ДНК микробов в единичном количестве. Это невозможно сделать, например, при микроскопии и бактериологическом посеве.

Показания к назначению ПЦР на ЗППП

ПЦР на ИППП назначается при возникновении симптоматики венерических заболеваний:

  • зуд и жжение в гениталиях;
  • проблемы с мочевыведением;
  • подозрительные выделения;
  • покраснение влагалища у женщин или полового члена у мужчин;
  • сыпь на гениталиях;
  • разрастание эпителия в шейке матки;
  • эрозии на половых слизистых;
  • воспаления в мочеполовой системе;
  • изменение цвета спермы при подозрении на ИППП у мужчин;
  • увеличение лимфоузлов в паху;
  • сбои в менструальном цикле;
  • выкидыши, патологии беременности, проблемы с зачатием;
  • киста яичников;
  • спайки в органах малого таза;
  • боли внизу живота;
  • простатит у представителей мужского пола.

ВАЖНО!!!Вне зависимости от того проявлялись ли перечисленные симптомы, обследование методом ПЦР на ИППП (инфекция, передающаяся половым путем) должны периодически проходить люди, которые ведут беспорядочную половую жизнь, а также женщины при планировании беременности и во время вынашивания плода. Как правило, врач выдает направление на ПЦР, когда уже сданы анализы ОАК и ОАМ, соскоб из уретры и цервикального канала для ИФА, микроскопии или бактериологии., но возбудителей определить не удалось.

Какие инфекции диагностируют методом ПЦР

Диагностика ИППП ПЦР позволяет обнаружить:

  • Хламидиоз и уреаплазмы. Первое заболевание провоцируют хламидии. Они ведут жизнедеятельность в уретре, кишечнике, шейке матки. Без должного лечения приводят к бесплодию. Второй возбудитель вызывает уреаплазмоз. Чаще всего эта болезнь протекает бессимптомно и становится причиной выкидышей.
  • ВИЧ, сифилис и нейросифилис. Последнее заболевание по симптоматике схоже с менингитом.
  • Герпес (простой ВПГ 1 и 2 тип).
  • Токсоплазмоз и краснуху.
  • Инфекционный мононуклеоз (ДНК вируса Эпштейн-Барр-ВЭБ).
  • Микоплазмоз. Мужчины чаще всего являются только носителями инфекции.
  • Трихомониаз. У представителей мужского пола чаще всего протекает бессимптомно или проявляется только жжение при походах в туалет «по-маленькому». У женщин зачастую бывает обнаружено сопутствующее заболевание — трихомонадный кольпит.
  • Кандидоз (молочница).
  • ВПЧ штаммы 16 и 18 (вирус папилломы человека). Есть в организме практически у каждого человека. Большинство штаммов не представляют угрозы, но есть и такие, которые могут привести к онкологии.
  • Цитомегаловирус. Обычно не провоцирует выраженную клиническую картину. Протекает в форме обычного ОРВИ.
  • Гонорея. Провоцирует желтовато-белые выделения с неприятным запахом.
  • Гарднереллез (бактериальный вагиноз). Клиническая картина схожа с молочницей.
  • Туберкулез, листериоз, хеликобактерную инфекцию.
  • Боррелиоз, клещевой энцефалит.

Как стало понятно, ПЦР анализ способен обнаружить возбудителей не только венерических заболеваний. Поэтому для постановки точного диагноза эту методику используют специалисты разных областей: урологи, гематологи, фтизиатры, гинекологи, гастроэнтерологи, онкологи, инфекционисты, венерологи.

Преимущества и недостатки ПЦР диагностики

ПЦР анализ на ИППП обладает такими преимуществами:

ПЦР анализ на ИППП обладает такими преимуществами: Высокая чувствительность и точность показаний. Если в биоматериале присутствует ДНК возбудителя даже в единичном количестве, диагностика его обнаружит. Быстрое получение результатов. На ПЦР можно производить любой забор биологического материала. Специфичность 100%. Во время исследования обнаруживают специфичный фрагмент ДНК, принадлежащий определенному патогену. Доступность метода. Для проведения диагностики не нужно специального дорогостоящего оборудования, поэтому ее делают во многих клиниках. Достаточно взять биоматериал один раз, чтобы обнаружить инфекцию. Анализ на ЗППП имеет и недостатки: вероятность ложного результата (хотя такое бывает крайне редко, но все-таки риск есть) если микроорганизмы мутируют, то обследование не выявит их ДНК (такое бывает крайне редко); чтобы обнаружить скрытые инфекции (например, трихомониаз или хламидиоз), бывает необходима стимуляция; процедура достаточно дорогостоящая (500-2000 руб.).

Достоинств у ПЦР диагностики ИППП значительно больше, поэтому ее очень часто используют в медицинской практике.

Как подготовиться к ПЦР исследованию на ЗППП

Перед диагностикой ИППП к ПЦР нужно подготовиться:

  • Обследование крови должно совершаться натощак. Запрещены и напитки, кроме небольшого количества питьевой воды.
  • За сутки нельзя пить алкоголь, курить, нужно снизить физические нагрузки и избегать стрессовых ситуаций.
  • За 2-3 дня до диагностики ИППП методом ПЦР отказаться от жареных и жирных блюд.
  • За 1-2 суток при сдаче мочи отказаться от интимной близости. Биологический материал собирать сразу после пробуждения.
  • При сдаче семенной жидкости за 4 дня не переохлаждать и не перегревать организм. За 2 суток не заниматься сексом.
  • Женщинам рекомендуется сдавать мазок ПЦР в последний день менструального цикла, когда еще есть незначительные выделения. Не вступать в половой контакт за 2 суток, не проводить гигиену гениталий за 3 часа.
  • При диагностировании сыпи берется соскоб. Перед ним за несколько дней нельзя использовать препараты местного назначения.
  • Не принимать антибиотики за 2-4 недели до сдачи мочи и другого биологического материала. Если отменить лекарства невозможно, сообщить об этом медицинскому работнику.
  • Накануне вечером перед сдачей анализа на ЗППП ПЦР гигиену половых органов осуществлять только водой, без использования гигиенических средств.

Выполнение этих правил необходимо для достоверного диагноза. Если точного результата нет, через сколько сдавать анализ повторно, решает врач.

Расшифровка результатов обследования

Такой анализ как ПЦР мочи и другого биологического материала бывает двух типов:

  • Качественным. Результаты в листке с анализом могут иметь отрицательное и положительное значение. В первом случае возбудитель не найден, а во втором обнаружен.
  • Количественным. Определяет число определенных патогенов. Значение 8х105МЕ/мл указывает на острую форму болезни, а 4х105МЕ/мл на процесс выздоровления.

Более точную расшифровку может дать только специалист.

Сдача ПЦР анализов после окончания антибиотикотерапии

После того, как пациент пролечился от заболевания, ему необходимо сдать контрольный анализ. Однако антибиотикотерапия может негативно отразиться на ПЦР. Дело в том, что частицы уже погибших патогенов еще некоторое время находятся в организме. ПЦР не сможет определить их жизнеспособность и даст ложный результат. Поэтому перед тем, как сдавать анализы, после прохождения курса лечения должно пройти минимум 4 недели.

Как часто сдавать ПЦР анализ на ЗППП, если ничего не беспокоит

При возникновении симптоматики заболеваний, которые диагностирует ПЦР, нужно сразу же сдать данный анализ. Также диагностика показана женщинам во время беременности, людям, которые имели за последние полгода двух и более половых партнеров. Анализ назначается и через месяц после окончания лечения ИППП, чтобы убедиться, что все патогены погибли.

ПЦР диагностика является предпочтительной при подозрении на ЗППП. Она позволяет не только выявить ДНК возбудителя, но и определить его количество. Благодаря этому врач сможет подобрать наиболее эффективную методику терапии, а значит, удастся избежать опасных осложнений.